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技術(shù)文章

Technical articles
  • 2015

    10-29

    成功完成WB檢測,必須滿足的4個(gè)條件

    免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測,可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。成功完成WesternBlot檢...
  • 2015

    10-26

    上海恒遠(yuǎn)解說ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

    時(shí)光匆匆而過,十月進(jìn)入尾聲,即將迎來購物狂潮“雙11”,在十月購我司ELISA試劑盒的老師多個(gè)選擇我司待測,在實(shí)驗(yàn)中我司技術(shù)整理了相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù),下面我們就來看看:上海恒遠(yuǎn)解說ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備!1、其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。2、將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專一性、特異性相結(jié)合,以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測試,所以具有很高的靈敏度。3、實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進(jìn)...
  • 2015

    10-22

    恒遠(yuǎn)技術(shù)講解:ELISA空白孔顯現(xiàn)陽性的原因

    近日,上海大學(xué)金老師實(shí)驗(yàn)后來電向我司咨詢ELISA空白孔為什么顯現(xiàn)陽性?金老師的實(shí)驗(yàn)流程大致是:包被放置一晚4攝氏度12小時(shí)-一抗65分鐘-二抗45分鐘-顯色15分鐘“-"表示洗板,洗五次,每次3min。空白孔為不包被,加一抗和二抗,結(jié)果空白孔比陽性值還高。通過了解我司技術(shù)人員經(jīng)過詳細(xì)分析后給出以下幾種可能:1.手工洗板嗎,臨近空白孔的標(biāo)準(zhǔn)品濃度zui高,有可能甩液體的時(shí)候沒注意,標(biāo)準(zhǔn)孔的倒流到空白孔去了哦!2.如果沒有封閉,有可能是未經(jīng)過封閉的板子對一抗有吸附作用,吸附一抗...
  • 2015

    10-21

    ELISA加樣時(shí)移液槍的正確使用方法

    大家經(jīng)常會討論移液的問題,這個(gè)步驟在ELISA實(shí)驗(yàn)中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時(shí)候是定量的,產(chǎn)生氣泡可能會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響蠻大的??傊?,掌握微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是可以幫助您在實(shí)驗(yàn)中避免不必要的麻煩。1.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。2.試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加...
  • 2015

    10-14

    實(shí)驗(yàn)必知:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇

    在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之...
  • 2015

    10-9

    實(shí)驗(yàn)新手如何獨(dú)立看懂ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    ELISA測定按其表示測定結(jié)果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結(jié)論,分別用“陽性”和“陰性”來表示??梢姸ㄐ詼y定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定,以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對標(biāo)本中待測抗原的多少進(jìn)行量值測定,以具體數(shù)值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測定,如激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物、小分子藥物等。FP,hCG、細(xì)胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”的判...
  • 2015

    9-29

    科研試劑使用注意事項(xiàng)

    試劑是試驗(yàn)、研究開發(fā)方面*的化學(xué)物質(zhì)。但有些試劑會因操作有誤而引起意想不到的事故。這樣的試劑大體可分為具有引發(fā)火災(zāi),爆炸的危險(xiǎn)性;因裸露而對人體產(chǎn)生傷害的有害特性;以及保管中因自然分解而引發(fā)意想不到的事故的危險(xiǎn)性。當(dāng)然,有些試劑同時(shí)具有多種危險(xiǎn)特性。因此,在使用時(shí)必須注意安全,從開封,保管,直到廢棄,希望實(shí)施責(zé)任制管理。要認(rèn)識到所有的試劑都具有“不被人知的危險(xiǎn)有害性”,防止化學(xué)事故發(fā)生?!褓徺I后,請務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)?!褡龊妙A(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制。●在使用前再次...
  • 2015

    9-24

    未使用完的96孔板試劑盒該作何處理

    ELISA試劑盒包裝規(guī)格的大小取決于試劑盒里面酶標(biāo)板的規(guī)格大小,常見的有96T(12孔乘以8條)跟48T(12孔乘以4條)兩種。所以當(dāng)您在選擇ELISA試劑盒的時(shí)候考慮自己樣本的收集量再做選擇,以免造成浪費(fèi)。也許您會想剩余沒用完的板可以再保存等下次實(shí)驗(yàn)重新使用。我司技術(shù)卻不贊同該做法,不僅僅是因?yàn)榛厥盏陌遄訉竺鎸?shí)驗(yàn)會造成比較大的誤差。所以選購ELISA是應(yīng)該考慮另外兩個(gè)問題:一、經(jīng)濟(jì):一塊96孔板,進(jìn)口的也貴不到哪去,國產(chǎn)的更便宜,你重復(fù)利用,這么一折騰,時(shí)間,精力以及洗板...
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